相差显微镜的成像原理

　　从波动光学的角度可把物体细节即生物标本的细节，看成是成像光束的障碍物。它可以改变相干光束的振幅、位相和光强分布。
　　从变换光学的频谱转换角度，可把物体细节看成是不同空间信息的集合物。它可改变光信息的空间频谱。
　　在显微镜下标本细节的光密物质、光疏物质和无结构的介质的折射率不同，因此相干光束通过光密物质(t)时，必然产生衍射，使光程延长，推迟位相。这时衍射光(P)和直射光(S)之间的位相出现d/λ差异。但是标本的吸收程度近似，所以振幅未变即光强末变。这种直射光和衍射光到达像平面重叠成像时，其合成波的振幅与通过无结构介质的直射光的振幅几乎近似，即其光强相似。这就是未染标本在普通显微镜下反差很小的基本原因。

        暗相差
　　在被检物的折射率大于介质的情况下，透过共轭面的直射光被吸收80%后亮度变暗，衍射光在通过被检物后其相位己推迟1/4波长，再在位相板的补偿面的电解质又推迟了1/4波长。由于这两束光的相位不同(差1/2波长)，其合成波的振幅为两者之差，所以光线就更加暗。
　　与此同时，通过无结构介质的衍射光的光程只被补偿面的电介质推迟l/4波长。这就造成通过光密物质的光强远比通过无结构介质(背景)的光强减衰得多。相差显微镜下标本细节的反差加大丁。光密结构比背景暗得多了。这种反差叫暗反差也叫 正反差。

　　明相差
　　如果相板的共轭面上涂的是减速物质，推迟直射光1/4波长，而补偿面涂的是吸光物质，结果就是直射光与衍射光的相位相同(衍射光通过物体时相位推迟了1/4波长)，其合成波的振幅为两者之和，结果物体是明亮的而背景是暗的，这称为明相差或负相差

相差显微镜实验方法和步骤
　　安放相差装置取下原有聚光器和物镜，分别安上相差聚光器和相差物镜，并将转盘转到“0”标记的位置。用10×相差物镜调光。
　　调节光源。
　　合轴调节取下原有目镜，换上合轴调整望远镜。上下移动望远镜筒，至能看清物镜中的相板环为止。
　　放回目镜取下合轴调整望远镜，放回目镜即可进行观察。更换不同放大倍数的相差物镜时，每次都要按上述方法重新调节。