视觉景深显微镜的实用价值
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在DIN / ISO标准中,字段的对象侧上的深度被定义为“物体面的两侧上的空间内的轴向深度,可以移动对象图像中没有检测到损失锐度,而的图像平面的位置和物镜维持“。
但是,标准的不给任何线索如何衡量检测阈值恶化的焦点。作者首次发表的主题明显经验丰富的景深是最大贝雷,早在1927年出版了他广泛的实验结果。贝雷公式给出的视觉景深的实用价值,因此一直沿用到今天。在其简化的形式,如下所示:
Ţ VIS = N [λ/(2×NA²)+ 340um/(NA×M TOT VIS)]
Ť VIS:视觉经验的深度的领域,n:折射率介质中的对象是位于。如果对象被移动时,输入的介质的折射率,形成不断变化的工作距离在方程。λ:所用的光波长,为白色光,λ= 0.55微米,NA:数值孔径的对象侧上,M TOT VIS:总VIS视觉放大倍率的显微镜
如果在上面的方程中,有效的放大倍数(M TOT VIS = 500 1000×NA)的关系的总的视觉倍率被替换,可以看出,第一个近似值,景深的平方成反比的数值孔径。
特别是在低放大倍数,景深可以显着地增加,通过停止下来,即减少的数值孔径。这通常是用在共轭平面上的孔径光阑或隔膜。然而,较小的数值孔径,较低的横向分辨率。
因此它是一个问题,找到最佳平衡,根据该对象的结构的分辨率和景深。现代光学显微镜的高分辨率目标(高NA)和可调光圈隔膜,实现灵活的匹配要求的特定的样品的光学。在体视显微镜的情况下,往往是必要的z维度的三维结构作出了一定的妥协赞成较高的景深,频繁地要求。
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