共焦显微镜类型及应用原理
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一. 共焦显微镜的类型:
1.点(慢)扫描共焦显微镜: 分辨率高, 图像清晰;
噪音低;
采集图像速度慢;
目镜中观察不到共焦图像;
2.线(狭缝)扫描共焦 显微镜(video rate): 分辨率低;
噪音高;
扫描速度快 240幅/秒;
目镜中可观察到共焦图像
3.Nipkov转盘式扫描共焦显微镜: 性能介于上述两者之间
功能:1.多荧光标记样品的图像采集
2.无损伤、连续光学切片,显微“CT”
3.真正的三维重组
4.假三维图的显示
5.可沿Z轴(xy平面)和Y轴(xz平面)方向进行光切
6.定量分析
7.xyt 、xzt、xyzt 和 xt 扫描―― 时间序列扫描
8.图像处理
9. 旋转扫描
10.区域扫描
11.光谱扫描
二、激光扫描共焦显微镜技术的应用
定位、定量
三维重组
动态测量
*活细胞或组织内游离Ca2+浓度的测量
*活细胞内H+浓度( pH值)的测量
*自由基的检测
*药物进入细胞的动态过程、定位分布及定量
应用:细胞膜电位的测量
荧光漂白恢复(FRAP)的测量
笼锁解笼锁的测量
荧光能量共振转移(FRET)的测量
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